Die Aufregung im Vatikan ist groß. Nicht nur das vier Kardinäle entführt wurden, welche beim aktuellen Konklave als Favoriten gelten, auch aus einem Schweizer Labor entwende Antimaterie droht den Vatikan komplett in die Luft zu sprengen. Alle Anzeichen deuten darauf, dass die "Illuminati" dahinter stecken, ein Jahrhunderte alter und eigentlich auch nicht mehr bestehender Geheimbund, der als größter Gegner der Kirche gilt. Deshalb rufen sie den Mann zur Hilfe, den sie seit seiner letzten Aufklärungsaktion eigentlich hassen wie die Pest: Robert Langdon (Tom Hanks). Langdon, der die "Illuminati" in all seinen Facetten studiert hat, soll nun den Vatikan aus seiner misslichen Lage befreien und die Kardinäle aus der Hand eines brutalen Assassine retten. Die Kernforscherin Vittoria Vetra(Ayelet Zurer), welche an der Herstellung der Antimaterie beteiligt war, hilft ihm dabei. Doch die Suche nach den Kardinälen und der Antimaterie erweist sich mehr als schwierig und die Jagd quer durch Rom wird zum Martyrium. Zumal der eigentliche Drahtzieher ihnen immer einen Schritt voraus zu sein scheint. Kann Robert die Katastrophe dennoch verhindern?